Introdução: A osteoartrite (OA) é uma doença articular degenerativa que continua difícil de tratar devido à falta de compreensão completa de sua patologia. Estudos anteriores identificaram o RO5126766 (RO) como um composto de pequena molécula que inibiu a via RAF/MEK-ERK e atraiu muito interesse por suas propriedades anticâncer. Mas seu papel no tratamento da OA ainda não está claro.

Métodos: Este estudo empregou o procedimento de transecção do ligamento cruzado anterior (ACLT) para criar um modelo de OA em camundongos. Os efeitos da RO nas alterações patológicas na cartilagem articular e no osso subcondral foram avaliados por meio de microtomografia computadorizada e coloração histológica. Os camundongos receberam injeções peritoneais de RO a 1 mg/kg e 5 mg/kg quinzenalmente por 4 semanas após o ACLT, enquanto os camundongos controle receberam solução salina. In vitro, macrófagos derivados da medula óssea foram cultivados para examinar os efeitos da RO na ativação de osteoclastos usando imunofluorescência, coloração com TRAP e ensaios de reabsorção óssea. A degeneração inflamatória dos condrócitos e os níveis de expressão gênica foram avaliados por meio de coloração e RT-qPCR. Western blot e imunohistoquímica foram usados para analisar a sinalização de MAPK e a expressão de proteínas relacionadas à autofagia, investigando o mecanismo molecular da RO no tratamento da OA. Dados de células únicas humanas também foram analisados para identificar genes e vias reguladas positivamente em tecidos de OA.

Resultados: Nossas descobertas mostraram que o RO protege o osso subcondral ao inibir a formação de osteoclastos no modelo de OA de camundongo ACLT. In vitro, foi demonstrado que a RO inibe a diferenciação dos osteoclastos e reduz a degeneração inflamatória dos condrócitos. Mecanicamente, o RO neutralizou a hiperativação dos osteoclastos subcondrais suprimindo a via de sinalização ERK/c-Fos/NFATC1. Além disso, o RO inibiu a degeneração inflamatória dos condrócitos induzida por LPS e aumentou a autofagia por meio da via ERK. A análise de uma única célula confirmou ainda uma regulação positiva significativa da via de sinalização ERK em tecidos de OA humanos.

Conclusões: No geral, nossos resultados sugeriram que a RO inibiu a diferenciação dos osteoclastos e protegeu a cartilagem articular, sugerindo seu potencial como um novo tratamento para a OA.

Potencial de tradução deste artigo: Neste estudo, comprovamos, pela primeira vez, o potencial terapêutico da RO no tratamento da OA. Ao demonstrar sua capacidade de inibir a diferenciação dos osteoclastos e proteger a cartilagem articular, a RO pode oferecer um novo caminho para tratamentos modificadores da doença na OA. Assim, este artigo fornece informações valiosas sobre a compreensão dos mecanismos moleculares e do tratamento da OA.

Palavras-chave: Condrócito ; Degeneração; via ERK; Osteoartrite; diferenciação de osteoclastos; RO5126766.